Metodi mikrobijoloġiċi ta 'ilma, ħamrija, arja

Mikroorganiżmi huma l-iżgħar, l-aktar kreaturi b'ċellula waħda, mifruxa fin-natura. Jinstabu fl-ambjenti kollha (arja, ħamrija, ilma), fil-ġisem tal-bniedem u l-annimali, fil-pjanti.

Il-varjetà kwalitattiva u n-numru ta 'mikro-organiżmi jiddependu primarjament minn komposti nutrittivi. Madankollu, l-umdità, ir-reġim tat-temperatura, l-arjazzjoni, l-azzjoni tar-raġġi tax-xemx u fatturi oħra huma wkoll ta 'importanza kbira.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Metodi ta 'studju mikrobijoloġiku sanitarju tal -medja naturali jippermettu li tiġi identifikata l-preżenza ta' mikro-organiżmi patoġeniċi, jiddeterminaw in-numru tagħhom u, skont ir-riżultati miksuba, jiżviluppaw miżuri biex jeliminaw jew jipprevjenu mard infettiv. Barra minn hekk, kontabilità kwantitattiva hija meħtieġa għall-immudellar tal-ekosistemi u għall-iżvilupp tal-prinċipji għall-ġestjoni tal-proċessi naturali. . Ejja nħarsu aktar, liema huma l- metodi tar-riċerka mikrobijoloġika .

Ħamrija

Huwa meqjus mix-xjentisti bħala wieħed mill-modi possibbli ta 'trażmissjoni ta' patoloġiji infettivi. Bit-tneħħija ta 'nies jew annimali morda, mikro-organiżmi patoġeniċi jippenetraw il-ħamrija. Xi wħud minnhom, b'mod partikolari, l-ispora, jistgħu jgħixu fl-art għal żmien twil (kultant bosta għexieren ta 'snin). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). Patoġeni ta 'infezzjonijiet perikolużi bħal tetnu, anthrax, botuliżmu, eċċ, jidħlu fil-ħamrija. Metodi ta' investigazzjoni tal-ħamrija sanju-mikrobijoloġika jippermettu li jiġi determinat in- "numru mikrobjali" (numru ta 'mikroorganiżmi fi gramma ta' ħamrija), kif ukoll indi coli (numru E. coli) .

Analiżi tal-ħamrija: informazzjoni ġenerali

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Il- metodi tar-riċerka mikrobijoloġika tal-ħamrija għandhom l-ewwelnett jinkludu l-mikroskopija diretta u ż-żrigħ fuq medium ta 'nutrijent dens . Il-popolazzjonijiet ta 'mikro-organiżmi u l-gruppi tagħhom li jgħixu fil-ħamrija jvarjaw fil-pożizzjoni taxonomika u fil-funzjonijiet ekoloġiċi tagħhom. Fix-xjenza huma magħqudin taħt it-terminu ġenerali "biota tal-ħamrija". L-art hija l-ħabitat ta 'numru kbir ta' mikro-organiżmi. Fi gramma ta 'ħamrija hemm minn 1 sa 10 biljuni taċ-ċelluli tagħhom. F'dan l-ambjent, id-dekompożizzjoni ta 'sustanzi organiċi bil-parteċipazzjoni ta' mikroorganiżmi saprofitiċi varji tipproċedi.

Metodu mikroskopiku ta 'riċerka mikrobijoloġika: stadji

L-analiżi tal-ambjent tibda bit-teħid tal-kampjuni. Biex tagħmel dan, uża sikkina tal-alkoħol imnaddfa u mgħoddija minn qabel (tista 'tuża pala). Wara dan, il-kampjun huwa ppreparat. Il-pass li jmiss huwa l-għadd ta 'ċelluli fuq tbajja mtebbgħin. Ejja nqisu kull stadju separatament.

Teħid ta 'kampjuni

Meta tiġi analizzata l-ħamrija li tinħarat, bħala regola, il-kampjuni jittieħdu mill-fond tas-saff kollu. L-ewwel, neħħi 2-3 ċm mill-quċċata tal-ħamrija, minħabba li jista 'jkun fiha mikroflora barranija. Wara dan, il-monoliti jittieħdu mis-sit studjat tal-ħamrija. It-tul ta 'kull wieħed minnhom għandu jikkorrispondi mal-ħxuna tas-saff li minnu għandek bżonn tieħu kampjun.

Fuq plott ta '100-200 metru kwadru. M, jittieħdu kampjuni ta '7-10. Il-piż ta 'kull wieħed huwa madwar 0.5 kg. Il-kampjuni għandhom jitħalltu sewwa f'borża. Wara dan, ħu kampjun medju li jiżen madwar 1 kg. Għandha titqiegħed f'borża tal-parċmina (sterili), imdaħħla f'borża tat-tessut. Qabel l-analiżi diretta, il-kampjun jinħażen fil-friġġ.

Preparazzjoni għar-riċerka

Il-ħamrija mħallta titferra 'fuq il-ħġieġ xott. Preliminari għandu jintmesaħ bl-alkoħol u jinħaraq fuq il-berner. Permezz ta 'spatula, il-ħamrija hija mħallta sewwa u mqiegħda b'mod indaqs. Mingħajr dubju huwa meħtieġ li jitneħħew l-għeruq, elementi estranji oħra. Għal dan, jintużaw pinzetti. Qabel ix-xogħol, il-pinzetti u l-ispatula jiġu kkalċinati fuq il-berner u mkessħin.

Minn partijiet żgħar tal-ħamrija mqassma fuq il-ħġieġ, jittieħdu porzjonijiet żgħar. Huma jintiżnu f'tazza tal-porċellana fuq skala teknika. является специальная обработка образца. Stadju obbligatorju tal- metodu mikroskopiku ta 'investigazzjoni mikrobijoloġika huwa l-ipproċessar speċjali tal-kampjun. Huwa meħtieġ li jiġu ppreparati 2 fliexken sterili bil-quddiem. Il-kapaċità tagħhom m'għandhiex taqbeż il-250 ml. 100 ml ta 'ilma tal-vit jitferra' f'wieħed mill-fliexken. Minnha tieħu 0.4-0.8 ml ta 'likwidu u xarraq id-dendil tal-ħamrija għal stat pastoso. It-taħlita għandha tkun mgħollija b'sinjal jew labra tal-gomma għal 5 minuti.

Bl-ilma mill-ewwel garafina, il-massa tal-ħamrija tiġi ttrasferita għal garafina vojta. Imbagħad terġa 'titgħawweġ. Wara dan, il-massa tiġi ttrasferita fil-flixkun viċin il-fjamma tal-berner. Il-kontenitur bis-sospensjoni tal-ħamrija jitħawwad fuq il-blat tal-blat għal 5 minuti. Wara dan, jitħalla joqgħod għal madwar 30 sekonda. Dan huwa meħtieġ sabiex partiċelli kbar jissolvew. Wara nofs minuta, il-massa tintuża biex tipprepara l-preparazzjoni.

Ċellula li tgħodd b'togħmiet fissi

, разработанному Виноградским. L-istudju mikroskopiku dirett tal-ħamrija jitwettaq skont il- metodu ta 'riċerka mikrobijoloġika żviluppata minn Vinogradsky. F'ċertu volum tas-sospensjoni mħejjija, in-numru ta 'ċelloli ta' mikroorganiżmi jingħadd. L-istudju tat-tbenġil fiss jippermettilek li tfaddal id-drogi għal żmien twil u twettaq kalkoli fi kwalunkwe ħin konvenjenti.

Il-preparazzjoni tad-droga hija kif ġej. Jiġi applikat ċertu volum tas-sospensjoni (normalment 0.02-0.05 ml) bl-użu ta 'mikropipetta fuq slide. Qed tinżamm taħlita ta 'soluzzjoni agar agar (taħlitiet ta' agaropectin polysaccharide u agarose estratt minn alka kannella u ħamra tal-Baħar l-Iswed), imħallta malajr u mqassma fuq żona ta '4-6 metru kwadru. Ara Id-duħħan imnixxef fl-arja u ffissat għal 20-30 minuta. Alkoħol (96%). Sussegwentement, il-preparazzjoni hija niedja b'ilma distillat, imqiegħed fis-soluzzjoni karbolika ta 'erythrosin għal 20-30 minuta.

Wara t-tbajja, jinħasel u jitnixxef fl-arja. Iċ-ċelloli jingħaddu b'għan ta 'immersjoni.

Iż-żrigħ fuq midja densa

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. Metodi mikroskopiċi ta 'riċerka mikrobijoloġika jagħmluha possibbli li jiġi identifikat numru kbir ta' mikro-organiżmi. Iżda, minkejja dan, il-metodu ta ' żrigħ huwa meqjus l-aktar komuni fil-prattika. L-essenza tiegħu tikkonsisti fiż-żrigħ tal-volum tal-preparazzjoni (sospensjoni tal-ħamrija) f'dixx Petri fuq medium dens.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Dan il- metodu ta 'riċerka mikrobijoloġika jippermetti li wieħed iqis mhux biss il-kwantità, iżda wkoll il-kompożizzjoni tal-grupp, u f'xi każijiet il-kompożizzjoni tal-ispeċi tal-flora mikroskopika. L-għadd tan-numru ta 'kolonji ġeneralment isir mill-qiegħ tad-dixx Petri fid-dawl trasmess. Fuq is-sezzjoni kkalkulata, id-dot jitpoġġa b'marka jew linka.

Analiżi tal-ilma

Il-mikroflora ta 'korp ta' l-ilma, bħala regola, tirrifletti l-kompożizzjoni tal-mikrobi tal-ħamrija ħdejnha. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. F'dan ir-rigward, il- metodi ta 'studju sanitarju u mikrobijoloġiku tal-ilma u l-ħamrija huma ta' importanza prattika partikolari fl-istudju tal-istat ta 'ekosistema partikolari. L-għadajjar friski fihom, bħala regola, il-mikrobi li fihom forma ta 'virga.

L-anerobi fl-ilma jinstabu fi kwantitajiet żgħar. Bħala regola, huma jirriproduċu fil-qiegħ tal-ġibjuni, fil-ħama, jieħdu sehem fil-proċessi tal-purifikazzjoni. Il-mikroflora ta 'l-oċeani u l-ibħra hija rrappreżentata prinċipalment minn batterji li jħobbu l-melħ (halophilic).

Prattikament l-ebda bjar artiġjanali ma jinstabu f'mikroorganiżmi. Dan huwa dovut għall-kapaċità ta 'filtrazzjoni tas-saff tal-ħamrija.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. Il- metodi ġeneralment aċċettati ta 'ttestjar mikrobijoloġiku tal-ilma huma d-determinazzjoni tan-numru tal-mikrobi u l-kolite jew l-indiċi koliform. L-ewwel indikatur jikkaratterizza n-numru ta 'batterji f'1 ml ta' likwidu. L-indiċi coli huwa n-numru ta 'E. coli preżenti f'l litru ta' ilma, u t-titolu kolite huwa l-kwantità minima jew id-dilwizzjoni massima tal-likwidu li fih xorta jistgħu jinstabu.

Determinazzjoni tan-numru tal-mikrobi

Dan il-metodu ta 'riċerka sanitarja dwar l-ilma mikrobijoloġiku huwa kif ġej. F'1 ml ta 'ilma, l-ammont ta' anerobi fakultattivi u aerobes mesofiliċi (intermedji) li huma kapaċi ta 'agar aġitat bil-laħam (il-mezz ewlieni tan-nutrijent) f'37 ° C huwa determinat. Matul il-jum biex jiffurmaw kolonji, viżibbli b'żieda ta '2-5 r. Jew bil-għajn.

является посев. L-istadju ewlieni ta 'dan il- metodu ta' riċerka mikrobijoloġika dwar l-ilma huwa żrigħ. Minn kull kampjun, mill-inqas 2 volumi differenti huma miżrugħa. Meta tanalizza l-ilma tal-vit, jiżdiedu 1-0.1 ml ta 'likwidu pur ma' kull tazza u 0.01-0.001 ml ta 'likwidu kontaminat. Għaż-żrigħ 0.1 ml jew inqas, il-likwidu jiġi dilwit b'ilma distillat (sterili). Ipprepara konsistentement dilwiti b'għaxar darbiet. 1 ml ta 'kull wieħed minnhom huwa miżjud ma' żewġ dixxijiet Petri.

Id-dilwizzjonijiet huma mimlija b'agar nutrijent. Għandu jkun imdewweb minn qabel u mkessaħ għal 45 grad. Wara tħawwad qawwi, il-medju jitħalla fuq wiċċ orizzontali biex jissolidifika. Fi 37 grad. L-għelejjel jitkabbru matul il-ġurnata kollha. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. Il- metodu tar-riċerka mikrobijoloġika dwar l-ilma li qed tiġi kkunsidrata jagħmilha possibbli li jitqiesu r-riżultati fuq dawk il-pjanċi fejn in-numru ta 'kolonji huwa bejn 30 u 300.

Ajru

Huwa meqjus bħala mezz ta 'transitu għall-mikroorganiżmi. являются седиментация (оседание) и аспирация. Il- metodi ewlenin ta 'studju mikrobijoloġiku ta' l-arja huma sedimentazzjoni (sedimentazzjoni) u aspirazzjoni.

Il-mikroflora ta 'l-ambjent ta' l-arja hija kondizzjonalment maqsuma f'varjabbli u kostanti. L-ewwel jinkludu l-ħmira, il-cocci li jiffurmaw il-pigmenti, il-baċilli baqra esporittivi, il-vireg u mikrorganiżmi oħra, reżistenti għat-tnixxif, espożizzjoni għad-dawl. Rappreżentanti tal-varjabbli mikroflora, li jidħlu fl-arja mill-abitat tas-soltu tagħhom, ma jdumux il-vijabbiltà tagħhom.

Fl-arja ta 'mikroorganiżmi megacities kbar huma ħafna aktar milli fl-ambjent ta' l-arja ta 'żoni rurali. Fuq l-ibħra, il-foresti tal-batterji huma ftit. L-ikklerjar ta 'l-arja huwa ffaċilitat bil-preċipitazzjoni: borra u xita. Fil-postijiet magħluqa ta 'mikrobi ħafna aktar milli fi spazji miftuħa. In-numru tagħhom jiżdied fil-perjodu tax-xitwa fin-nuqqas ta 'ventilazzjoni regolari.

Sedimentazzjoni

считается простейшим. Dan il- metodu ta 'riċerka mikrobijoloġika fil-mikrobijoloġija huwa kkunsidrat bħala l-aktar wieħed sempliċi. Hija bbażata fuq ir-riżoluzzjoni ta 'qtar u partiċelli fuq il-wiċċ ta' l-agar f'dixx petri miftuħ taħt l-azzjoni tal-gravità. Il-metodu ta 'sedimentazzjoni ma jiddeterminax b'mod preċiż in-numru ta' batterji fl-arja. Il-fatt hu li huwa pjuttost diffiċli li tinqabad frak żgħir ta 'partiċelli tat-trab u qtar ta' batterji fuq tazza miftuħa. Primarjament frak kbir jinżamm fuq il-wiċċ.

Dan il-metodu mhux użat fl-analiżi ta 'arja atmosferika. Dan l-ambjent huwa kkaratterizzat minn varjazzjonijiet kbar fil-veloċità tal-fluss ta 'l-arja. Madankollu, is-sedimentazzjoni tista 'tintuża fin-nuqqas ta' strumenti aktar sofistikati jew sors ta 'elettriku.

Id-determinazzjoni tan-numru tal-mikrobi titwettaq bil-metodu ta 'Omelyansky. Skondha, għal 5 minuti fuq il-wiċċ ta 'agar b'erja ta' 100 metru kwadru. Cm tissetilja n-numru ta 'batterji preżenti f'10 litri ta' arja.

Ordni 535 "Dwar l-unifikazzjoni ta 'metodi mikrobijoloġiċi ta' riċerka"

L-analiżi batterjoloġika tokkupa post importanti f'attivitajiet kliniċi u tal-laboratorju kumplessi mmirati lejn id-dijanjosi, il-prevenzjoni u t-trattament ta 'varjetà ta' mard infettiv. Madankollu, mhumiex limitati għar-riċerka ambjentali.

Ta 'importanza partikolari hija l-analiżi batterjoloġika ta' materjal bijoloġiku f'istituzzjonijiet mediċi. Għar-riċerki li jintefqu f'istituzzjonijiet mediċi, isiru rekwiżiti elevati. L-għan tal-Ordni "Fuq l-Unifikazzjoni tal-Metodi Mikrobijoloġiċi ta 'Riċerka" huwa li jtejjeb l-analiżi batterjoloġika, itejjeb il-kwalità u l-effettività tad-dijanjosi mikrobijoloġika.

Eżami mikroskopiku ta 'smears fin-nisa

Huwa metodu ewlieni ta 'analiżi fid-dijanjożi ta' infezzjonijiet trasmessi sesswalment u mard opportunistiku (ikkawżat minn batterji opportunistiċi).

L-analiżi mikroskopika tippermetti l-evalwazzjoni tal-kompożizzjoni kwalitattiva u kwantitattiva tal-mikroflora, tivverifika l-korrettezza tat-teħid tal-kampjuni. Pereżempju, il-preżenza ta 'epitelju vaġinali f'fosma meħuda mill-kanal ċervikali tindika ksur tar-regoli bijoloġiċi tal-kampjuni.

Ta 'min jgħid li l-eżami mikrobijoloġiku f'dan il-każ huwa ġeneralment akkumpanjat minn ċerti problemi. Huma assoċjati mal-fatt li fil-partijiet l-aktar baxxi tal-passaġġ ġenitali normalment hemm mikroflora varjata li tvarja f'perijodi ta 'età differenti. Sabiex tittejjeb l-effettività tal-istudju, ġew żviluppati regoli unifikati.

Dijanjosi ta 'infezzjonijiet virali

Dan jitwettaq permezz ta 'metodi ta' skoperta ta 'patoġeni ta' l-RNA u tad-DNA. Dawn huma bbażati l-aktar fuq id-determinazzjoni ta 'sekwenzi nukleotidi f'materjal patoloġiku. Għal dan, jintużaw sondi molekulari. Dawn huma aċidi nuklejċi prodotti artifiċjalment komplementari għal aċidi virali ittikjati b'tikketta radjuattiva jew biotin.

Karatteristika speċjali tal-metodu hija l-ikkupjar multiplu ta 'framment tad-DNA speċifiku, li jinkludi bosta mijiet (jew għexieren) ta' pari tan-nukleotide. Il-mekkaniżmu tar-replikazzjoni (ikkopjar) huwa li t-tlestija tista 'tibda biss f'ċerti blokki. Biex jinħolqu, jintużaw il-primers (primers). Huma oligonukleotidi sintetizzati.

Dijanjostiċi tal-PCR (reazzjoni katina tal-polimerasa) huma faċli biex jitwettqu. Dan il-metodu jippermettilek tikseb riżultat malajr bl-użu ta 'ammont żgħir ta' materjal patoloġiku. Bl-għajnuna tad-dijanjostiċi tal-PCR, jinstabu infezzjonijiet akuti, kroniċi u moħbija (moħbija).

B'sensittività, dan il-metodu huwa kkunsidrat preferibbli. Madankollu, bħalissa s-sistemi tat-test mhumiex affidabbli biżżejjed, għalhekk id-dijanjostiċi tal-PCR ma jistgħux jissostitwixxu għal kollox il-metodi tradizzjonali.