Testijiet seroloġiċi: tipi, l-użu

dijanjosi tal-laboratorju ta 'kważi mard infettiv kollu hija bbażata fuq is-sejba ta' demm fil antikorpi tal-pazjent, li huma prodotti mill-antiġen patoġenu, metodi seroloġiċi. Huma marru fil-prattika medika fil-dsatax tard - seklu għoxrin kmieni.

L-iżvilupp tax-xjenza għenet biex jiddefinixxi l-istruttura antiġenika ta 'mikrobi u l-formuli kimiċi ta' tossini tagħhom. Huwa possibbli li jinħolqu fis-serum mhux biss terapewtiku iżda wkoll dijanjostiku. Dawn huma miksuba bl-għoti annimali tal-laboratorju patoġeni attenwati. Wara diversi jiem ta 'tixrib fniek tad-demm jew ġrieden prodotti użati għall-identifikazzjoni ta' batterji jew tossini tagħhom li jużaw testijiet seroloġiċi ppreparati.

L-manifestazzjoni esterna ta din ir-reazzjoni tiddependi mill-kondizzjonijiet ta 'formulazzjoni tagħha u l-istat ta' antiġeni fid-demm tal-pazjent. Jekk mikrobi huma partikoli insolubbli, huma joqgħod, lysed, immobilizzat jew marbuta fis-serum. Jekk il-antiġeni huma solubbli, jidher l-fenomenu ta 'newtralizzazzjoni jew preċipitazzjoni.

agglutinazzjoni (AĦ)

test ta 'agglutinazzjoni seroloġiku huwa speċifiku ħafna. Huwa faċli biex iwettqu u huwa pjuttost ċar li malajr jikxfu l-preżenza ta 'antiġeni fis-serum pazjent. Huwa użat għall-iffissar reazzjoni Vidal (dijanjosi tal tifojde u paratifojde) u WEIGL (tifu).

Hija bbażata fuq l-interazzjoni speċifika bejn antikorpi umani (jew agglutinini) u taċ-ċelluli mikrobjali (agglyutenogenami). Wara l-interazzjoni tagħhom huma ffurmati partiċelli li jippreċipita. Dan huwa sinjal pożittiv. Biex jiġu stabbiliti reazzjoni tista 'tintuża aġenti ħajjin jew mejtin mikrobjali, fungi, protozoa, ċelluli tad-demm u ċelloli somatiċi.

reazzjoni kimika huwa maqsum f'żewġ stadji:

1. antikorpi speċifiċi kompost (AT) ma antiġeni (Ag).
2. Mhux speċifiku --depożizzjoni tal-konglomerati AG AT, jiġifieri l-formazzjoni tal-tagglutinax.

Reazzjoni agglutinazzjoni indirett (TPHA)

Din ir-reazzjoni huwa aktar sensittiv minn dak preċedenti. Huwa użat għall-dijanjosi ta 'mard ikkawżat minn batterji, parassiti intraċellulari, protożoa. Huwa tant speċifiċi li jistgħu jindividwaw anke konċentrazzjonijiet baxxi ħafna ta 'antikorpi.

Għal formulazzjoni tagħha użu ta 'ċelloli ħomor tad-demm tan-nagħaġ purifikat u l ċelloli ħomor tad-demm ta' oriġini umana diġà ikkurati b'antikorpi jew antiġeni (dan jiddependi fuq liema laboratorju trid issib). F'xi każijiet, ċelluli tad-demm ħomor umani kkurati immunoglobulini. rispons seroloġiku ta 'eritroċiti huwa meqjus validu jekk preċipitazzjoni tiegħu seħħew fil-qiegħ tat-tubu. Ir-reazzjoni pożittiva nistgħu ngħidu meta ċ-ċelloli huma rranġati fil-forma ta 'umbrelel maqlub, li jokkupaw il-qiegħ kollu. Ir-reazzjoni negattiva hija skorja meta ċ-ċelloli ħomor tad-demm jsolvi fil-forma ta 'kolonna jew buttuni fiċ-ċentru tal-qiegħ.

Reazzjoni preċipitazzjoni (RP)

Reazzjonijiet seroloġiċi ta 'dan it-tip sservi sabiex tidentifika antiġeni partiċelli żgħir ħafna. Dan jista 'jkun, per eżempju, proteini (jew partijiet minnhom), komposti tal proteini ma lipidi jew karboidrati, parti mill-batterji u tossini tagħhom.

Sera għall-reazzjoni jinkiseb billi infestazzjoni artifiċjali tal-annimali, tipikament fniek. F'dan il-metodu, inti tista 'tikseb assolutament ebda serum preċipitant. Stadji seroloġiku mekkaniżmu simili preċipitazzjoni ta 'azzjoni fuq agglutinazzjoni. L-antikorpi li jinsabu fil-jorbot serum għall-antiġeni fil- soluzzjoni kollojdali biex jiffurmaw molekuli proteina kbar, li huma depożitati fuq il-qiegħ tat-tubu jew fuq is-sottostrat (ġell). Dan il-metodu huwa meqjus bħala speċifiku ħafna u jistgħu jindividwaw anke traċċi tas-sustanza.

Wżati għad-dijanjosi pesta, tularemia, anthrax, meninġite u mard ieħor. Wkoll involuti fl-eżami forensika.

test preċipitazzjoni Ġell

testijiet seroloġiċi jistgħu jitwettqu mhux biss f'forma likwida, iżda fil-ġell agarose. Din tissejjaħ metodu preċipitazzjoni diffużi. Magħha, tistudja l-kompożizzjoni ta 'taħlitiet antiġeniċi kumplessi. Dan il-metodu huwa bbażat fuq il-chemotaxis ta 'antiġeni għall-antikorpi, u viċi versa. Il-ġell huma jimxu lejn xulxin b'veloċitajiet differenti u laqgħa biex jiffurmaw linji preċipitazzjoni. Kull linja - sett wieħed ta 'K-AT.

antitossin exotoxin newtralizzazzjoni (RN)

serum antitossiċi jista 'jinnewtralizza exotoxin li mikroorganiżmi jipproduċu. Ibbażat fuq din id-data u t-testijiet seroloġiċi. Mikrobijoloġija juża dan il-metodu għat-titrazzjoni tal sera, tossini u tossojdi, kif ukoll l-attività terapewtika tagħhom. Il-qawwa tal-newtralizzazzjoni tal-tossina huwa determinat mill-unitajiet konvenzjonali - AE.

Barra minn hekk, minħabba din ir-reazzjoni tista 'tiddetermina l-ispeċi jew tipi jappartjenu exotoxin. Huwa użat fid-dijanjosi ta tetnu, difterite, botuliżmu. L-istudju jista 'jitwettaq "fuq il-ħġieġ", u b'mod ġel.

Reazzjoni lisi (RL)

Is-serum immuni, li jidħol fil-ġisem tal-pazjent, ikollu, apparti mill-funzjoni prinċipali tagħha ta 'immunità passiva, anki u l-proprjetajiet lytic. Huwa kapaċi tħoll aġenti mikrobiċi, elementi ċellulari u barranin virus jidħlu fil-ġisem tal-pazjent. Jiddependi fuq il-ispeċifiċità tal-antikorpi inklużi fil-serum iżolati bactericidin, cytolysins, spirohetoliziny, hemolysins u oħrajn.

Dawn l-antikorpi speċifiċi huma msejħa "komplement". Jinstab fi kważi l fluwidi tal-ġisem, hija għandha struttura proteina kumplessa u hija sensittiva ħafna għal żieda fit-temperatura, jitħawwdu, aċidi u dawl tax-xemx dirett. Iżda fl-istat imnixxef jkun kapaċi jżomm proprjetajiet lytic tagħhom ta 'sa sitt xhur.

Hemm xi tipi ta 'testijiet seroloġiċi ta' dan it-tip:

- bacteriolysis;

- hemolysis.

Bacteriolysis isir permezz serum tad-demm tal-pazjent u serum immuni speċifiku mikrobi ħajjin. Jekk, allura l-riċerkatur jara l-lisi tat-batterji, u r-rispons se jitqiesu bħala numru suffiċjenti ta 'komplement pożittiv huwa preżenti fid-demm.

It-tieni risposta seroloġiku demm huwa li s-sospensjoni ta 'eritroċiti trattati fis-serum fih pazjent hemolysins, li huma attivati biss fil-preżenza ta Kompliment partikolari. Jekk ikun hemm wieħed, allura l-laboratorju jaraw ix-xoljiment ta 'ċelluli ħomor tad-demm. Din ir-reazzjoni hija użata ħafna fil-mediċina moderna biex tiddetermina l-titer ta komplement (jiġifieri, iżgħar ammont tagħha pprovokat lisi taċ-ċelluli ħomor tad-demm) fid-serum tad-demm u għall-produzzjoni ta 'komplement assaġġ vinkolanti. Kien b'dan il-mod li sar ir-reazzjoni seroloġika għall sifilide - Wasserman.

fissazzjoni kumplimentari (RSK)

Din ir-reazzjoni hija użata sabiex jinstabu antikorpi tas-serum għall-pazjent ta 'aġent infettiv kif ukoll biex jidentifikaw l-oriġinatur tal-istruttura antiġenika tiegħu.

Sa dan il-punt aħna deskritti testijiet seroloġiċi sempliċi. RAC meqjus reazzjoni diffiċli, peress li jinteraġixxu ma tnejn, iżda tliet elementi: antikorp, antiġen u tikkumplimenta. Essenza tiegħu tinsab fil-fatt li l-interazzjoni bejn l-antikorp u antiġen sseħħ biss fil-preżenza ta 'proteini tikkomplementa li huma adsorbit fuq il-wiċċ tal-ffurmat kumpless K-AT.

Infushom antiġeni wara ż-żieda ta 'komplement, suġġetti għal modifiki sostanzjali, li jindikaw il-kwalità tar-reazzjoni. Dan jista 'jkun lisi, hemolysis, immobilizzazzjoni, batteriċida jew l-effett batterjostatika.

Ir-reazzjoni innifsu sseħħ f'żewġ fażijiet:

1. Il-formazzjoni ta 'antikorpi antiġen, li mhuwiex viżwalment riċerkatur notevoli.
2. Nibdlu l-antiġen taħt l-azzjoni ta 'komplement. Din il-fażi normalment jistgħu jiġu rintraċċati għall-għajn. Jekk ir-rispons viżwali mhux viżibbli, allura l-użu l-sistema ta 'indikaturi addizzjonali li tippermetti sabiex jikxef bidliet.

sistema ta 'indikaturi

Din ir-reazzjoni hija bbażata fuq l-irbit ta komplement. Il tubi tat-test siegħa wara iffissar RSK miżjud eritroċiti nagħaġ purifikat u emolitika serum li ma fihomx komplement. Jekk it-tubu tħalliet komplement M'hemmx obbligi, se jissieħbu fl-kumpless N AT iffurmat bejn iċ-ċelloli tad-demm nagħaġ u hemolysin, u jikkawżaw xoljiment tagħhom. Dan ikun ifisser li l-DGC huwa negattiv. Jekk ċelluli ħomor tad-demm baqgħu intatti, allura, għaldaqstant, ir-reazzjoni huwa pożittiv.

Hemagglutination Inhibition (RHA)

Hemm żewġ Hemagglutination Inhibition fundamentalment differenti. Wieħed minnhom - seroloġiku, huwa użat għad-determinazzjoni gruppi tad-demm. F'dan il-każ eritroċiti jinteraġixxu ma 'antikorpi.

U t-tieni reazzjoni mhix relatata ma 'seroloġiku, peress ċelluli tad-demm ħomor jirreaġixxu ma emaglutinin prodotta mill-viruses. Peress li kull istimulant jaġixxi biss fuq eritroċiti speċifiċi (tiġieġ, nagħaġ, xadina), nistgħu nassumu din ir-reazzjoni dejjaq speċifiku.

rispons pożittiv jew negattiv ċar, huwa possibbli għall-post taċ-ċelloli tad-demm fil-qiegħ tat-tubu. Jekk dawn il-figura tixbaħ umbrella maqlub, allura l-virus mixtieqa huwa preżenti fid-demm tal-pazjent. U jekk l-ċelluli ħomor tad-demm iffurmati bħal kolonni muniti, m'hemm l-ebda patoġeni magħrufa.

Reazzjoni ta Hemagglutination Inhibition (HAI)

Din ir-reazzjoni speċifika ħafna, li tippermetti li tiġi stabbilita l-forma, it-tip ta 'virus jew il-preżenza ta' antikorpi speċifiċi fis-serum tad-demm tal-pazjent.

Essenza tiegħu tinsab fil-fatt li l-antikorpi miżjuda mal-tubu li jikkontjieni l-materjal tat-test, jipprevjeni depożizzjoni ta 'antiġeni fuq eritroċiti, u b'hekk waqfien Hemagglutination Inhibition. Din hija indikazzjoni kwalitattiva tal-preżenza tal-antiġeni speċifiċi fid-demm li virus mixtieqa partikolari.

immunofluorescence Reazzjoni (RIF)

Ir-reazzjoni hija bbażata fuq l-abbiltà li jidentifika kumplessi ma AT-AH mikroskopija fluworexxenti wara żebgħa flyuorohromnymi trattament. Dan il-metodu huwa sempliċi biex jintuża, ma teħtieġx iżolament tal-kultura pura u tieħu ftit ħin. Huwa indispensabbli għad-dijanjosi rapida ta 'mard infettiv.

Fil-prattika, dawn it-testijiet seroloġiċi huma maqsuma f'żewġ kategoriji: diretti u indiretti.

RIF diretta prodotta antiġenu li qabel pproċessata fis-serum fluworexxenti. U indiretta hija li l-mediċina hija l-ewwel ttrattat bl diagnosticum konvenzjonali jinkludi antibodies għal antiġen mixtieqa u mbagħad jerġa 'applikazzjoni xorrox fluworexxenti, li hija speċifika għall-proteini tal-kumpless K-AT, u ċelluli mikrobjali jsiru viżibbli permezz tal-mikroskopija.