Metodu ta 'riċerka batterjoloġika: stadji, għanijiet, karatteristiċi

L-istudju tal-batterja huwa ta 'importanza prattika kbira għall-bniedem. Sal-lum, instabu numru kbir ta 'procariji, li jvarjaw minn xulxin f'patoġeniċità, distribuzzjoni, forma, daqs, numru ta' flagelli u parametri oħra. Biex tistudja din ir-razza fid-dettall, jintuża metodu batterjoloġiku ta 'investigazzjoni.

X'inhuma l-metodi għall-analiżi ta 'ċelluli batteriċi?

Biex tiddetermina jekk il-batterji humiex patoġeniċi, il-kultura hi ttestjata b'diversi modi. Fost dawn:

1. Metodu batterjoskopiku.

2. Metodu batterjoloġiku.

3. Metodu bijoloġiku.

Metodi batterjoloġiċi u batterjoloġiċi ta 'riċerka huma bbażati direttament fuq il-ħidma ma' ċelloli prokarijoti, meta analiżi bijoloġika hija meħtieġa biex tistudja l-effett ta 'ċelloli bħal dawn fuq l-organiżmu ħaj ta' annimali sperimentali. Skond il-grad ta 'manifestazzjoni ta' ċerti sinjali tal-marda, ix-xjenzat jista 'jikkonkludi li hemm jew le batterji patoġeniċi fil-kampjun, u naturalment jimmultiplikahom fil-ġisem ta' l-annimal biex jikseb il-kultura u l-użu tagħhom f'xogħlijiet oħra.

Il-metodu batterjoloġiku tar-riċerka huwa differenti mill-metodu batterjoskopiku. Fl-ewwel wieħed, kultura preparata b'mod speċjali tal-prokarjoti ħajjin tintuża għall-analiżi, meta t-tieni wieħed jaħdem ma 'ċelluli mejta jew ħajjin fuq slide.

Stadji tal-metodu batterjoloġiku ta 'investigazzjoni. Mikrobijoloġija

Il-prinċipju tal-istudju tal-proprjetajiet tal-kultura batterika jista 'jkun utli kemm għall-mikrobijoloġi li stabbilixxew l-għan li jinvestigaw ċelloli prokarijoti kif ukoll għal assistenti tal-laboratorju li l-kompitu tagħhom huwa li jistabbilixxu l-patoġeniċità jew in-nuqqas ta' patoġeniċità tal-batterja u mbagħad jiddijanjostikaw il-pazjent.

Il-metodu ta 'studju tal-batterja huwa maqsum fi tliet stadji:

1. Iżolament ta 'batterji mill-kampjun oriġinali.

2. Żriegħ ta 'batterji u kultivazzjoni ta' kultura pura, studju tal-proprjetajiet tiegħu.

3. Studju dettaljat ta 'ċelluli batteriċi.

L-ewwel stadju

Il-kampjun, jew smear, jittieħed mill-wiċċ liberu tal-medju jew mill-pazjent. Għalhekk, irridu jiksbu "cocktail" minn varjetà ta 'speċi ta' batterji li għandhom jinżergħu għal mezz ta 'nutrijent. Kultant isir possibbli li jiġu identifikati immedjatament il-batterji meħtieġa, li jafu l-punti fokali ta 'distribuzzjoni tagħhom fil-ġisem.

Wara jumejn jew tlett ijiem, il-kolonji meħtieġa jintgħażlu u jintgħażlu fuq il-midja solida tad-dixxijiet Petri bl-għajnuna ta 'linja sterili. Bosta laboratorji qed jaħdmu mat-tubi tat-test, fejn jista 'jkun hemm mezz ta' nutrijent solidu jew likwidu . Allura huwa l-metodu batterjoloġiku ta 'riċerka fil-mikrobijoloġija.

It-tieni stadju

Wara l-kisba ta 'kolonji individwali ta' batterji, isir makro dirett u mikroanalisi. Il-parametri kollha tal-kolonji huma mkejla, il-kulur u l-għamla ta 'kull wieħed minnhom huma ddeterminati. Ħafna drabi jsir bl-għadd tal-kolonji fuq dixx Petri, u mbagħad fil-materjal tal-bidu. Dan huwa importanti fl-analiżi ta 'batterji patoġeniċi, li n-numru tagħhom jiddependi mill-grad tal-marda.

Il-metodu batterjoloġiku ta 'investigazzjoni, li t-tieni stadju tiegħu huwa li jistudja kolonji individwali ta' mikro-organiżmi, jista 'jkun assoċjat ma' metodu bijoloġiku għall-analiżi tal-batterja. Għan ieħor tax-xogħol f'dan l-istadju huwa li jiżdied l-ammont ta 'materjal ta' sors. Dan jista 'jsir fuq mezz ta' nutrijent, u huwa possibbli li jitwettaq esperiment in vivo f'organiżmi sperimentali ħajjin. Il-batterji patoġeniċi se jimmultiplikaw, u bħala riżultat, id-demm se jkun fih miljuni ta 'ċelloli prokarijoti. Mid-demm huwa faċli li tħejji l-materjal meħtieġ ta 'xogħol tal-batterja.

It-tielet stadju

L-aktar parti importanti tal-istudju hija d-determinazzjoni tal-proprjetajiet morfoloġiċi, bijokimiċi, tossiġeniċi u antiġeniċi tal-kultura batterika. Ix-xogħol jitwettaq b'għelejjel "ippurifikati" minn qabel fuq mezz ta 'nutrijent, kif ukoll bi preparazzjonijiet (ħafna drabi kkuluriti) taħt mikroskopju.

Biex tidentifika l-appartenenza ta 'batterji patoġeniċi jew kondizzjonalment patoġeniċi għal grupp sistematiku partikolari, kif ukoll biex tiddetermina r-reżistenza tagħhom għad-drogi, il-metodu batterjoloġiku ta' investigazzjoni jippermetti. Stadju 3 - antibijotiċi, jiġifieri analiżi tal-imġieba ta 'ċelluli batteriċi f'kundizzjonijiet ta' prodotti mediċinali fl-ambjent.

L-istudju tar-reżistenza tal-kultura għal antibijotiku huwa ta 'importanza prattika kbira meta jkun meħtieġ li jiġi preskritt għal pazjent partikolari l-mediċini neċessarji, u l-iktar importanti, effettivi. Hawnhekk u l-metodu batterjoloġiku tar-riċerka jista 'jgħin.

X'inhu mezz ta 'nutrijent?

Għall-iżvilupp u r-riproduzzjoni, il-batterji għandhom ikunu f'medja ta 'nutrijenti ppreparati minn qabel. Skond il-konsistenza, jistgħu jkunu likwidi jew solidi, u skond l-oriġini - veġetali jew annimal.

Ir-rekwiżiti bażiċi għall-midja tan-nutrijenti:

1. Sterilità.

2. Trasparenza massima.

3. Parametri ottimi ta 'aċidità, pressjoni osmotika, attività tal-ilma u kwantitajiet bijoloġiċi oħra.

Preparazzjoni ta 'kolonji iżolati

1. Il-metodu ta 'Drigalsky. Din tikkonsisti fl-applikazzjoni ta 'smear ma' diversi tipi ta 'mikro-organiżmi għal-linja batterika. Dan iċ-ċentru jitwettaq fuq l-ewwel dixx Petri b'mezz ta 'nutrijent. Barra minn hekk, mingħajr ma tinbidel il-linja, il-metodu ta 'materjal residwu jitwettaq fuq it-tieni u t-tielet platti Petri. Allura, fuq l-aħħar kampjuni tal-kolonja, il-batterji mhux se jkunu miżruha sewwa, biex b'hekk ikun aktar faċli li ssib il-batterja meħtieġa għax-xogħol.

2. Il-metodu Koch. Hija tuża tubi b'mezz ta 'nutrijent imdewweb. Hawnhekk, jitqiegħed ċinga jew pipetta b'folja ta 'batterji, u wara dan il-kontenut tat-tubu jitferra fuq pjanċa speċjali. L-agar (jew il-ġelatina) tiffriża wara ftit żmien, u fil-ħxuna tagħha huwa faċli li ssib il-kolonji meħtieġa taċ-ċelloli. Huwa importanti qabel ma tibda tiddilwa t-taħlita tal-batterja fit-tubi tat-test, sabiex il-konċentrazzjoni ta 'mikro-organiżmi mhix kbira ħafna.

Il-metodu batterjoloġiku ta 'investigazzjoni, li l-istadji tiegħu huma bbażati fuq l-iżolament tal-kultura batterika mixtieqa, ma jmurx mingħajr dawn iż-żewġ metodi biex jinstabu kolonji iżolati.

Antibijotijogramma

Viżwalment ir-reazzjoni tal-batterja għad-drogi tidher f'żewġ modi prattiċi:

1. Il-metodu tad-diski tal-karti.

2. Tgħammir ta 'batterji u antibijotiċi f'forma likwida.

Il-metodu tad-diski tal-karti jeħtieġ il-preżenza ta 'kultura ta' mikro-organiżmi li ġew imkabbra fuq bażi ta 'nutrijent solidu. Fuq dan il-mezz, jitqiegħdu bosta karti b'forma tonda, mimlijin b'antibijotiċi. Jekk il-mediċina tlaħħaq b'suċċess man-newtralizzazzjoni ta 'ċelluli batteriċi, wara li tali trattament jibqa' sit mingħajr kolonji. Jekk ir-reazzjoni għall-antibijotiku hija negattiva, il-batterja tibqa 'attiva.

Fil-każ li jintuża mezz ta 'nutrijent likwidu, l-ewwel jiġu ppreparati diversi tubi b'kulturi ta' batterji ta 'gradi differenti ta' dilwizzjoni. L-antibijotiċi huma miżjuda ma 'dawn it-tubi, u matul il-jum huma josservaw il-proċess ta' interazzjoni tas-sustanza u l-mikroorganiżmi. Fl-aħħar mill-aħħar, tinkiseb antibijotogramma kwalitattiva, li minnha wieħed jista 'jiġġudika l-effettività tal-mediċina għal kultura partikolari.

Il-kompiti ewlenin tal-analiżi

L-għanijiet u l-istadji tal-metodu batterjoloġiku ta 'l-investigazzjoni huma elenkati hawn.

1. Akkwista l-materjal tas-sors li se jintuża biex jiġu iżolati kolonji batteriċi. Jista 'jkun smear mill-wiċċ ta' kwalunkwe oġġett, membrana mukuża jew kavità tal-ġisem tal-bniedem, test tad-demm.

2. Kultivazzjoni tal-kultura fuq mezz ta 'nutrijent solidu. Wara 24-48 siegħa fuq petri dish, tista 'ssib kolonji ta' batterji ta 'speċi differenti. Aħna nagħżlu l-kriterji morfoloġiċi u / jew bijokimiċi meħtieġa u nagħmlu xogħol ieħor magħha.

3. Riproduzzjoni tal-kultura miksuba. Il-metodu batterjoloġiku tar-riċerka jista 'jkun ibbażat fuq metodu mekkaniku jew bijoloġiku biex jiżdied in-numru ta' kulturi batterjoloġiċi. Fl-ewwel każ, ix-xogħol isir b'mezzi nutrittivi solidi jew likwidi li fuqhom il-batterji jimmultiplikaw f'termostat u jiffurmaw kolonji ġodda. Il-metodu bijoloġiku jirrikjedi kundizzjonijiet naturali għal żieda fin-numru ta 'batterji, għalhekk l-annimal tat-test huwa infettat b'mikroorganiżmi hawn. Ftit jiem wara, ħafna procariots jistgħu jinstabu f'kampjun tad-demm jew smear.

4. Taħdem mal-kultura ppurifikata. Sabiex tiġi ddeterminata l-pożizzjoni sistematika tal-batterja, kif ukoll l-appartenenza tagħhom għal patoġeni, huwa meħtieġ li ssir analiżi bir-reqqa taċ-ċelloli skond il-karatteristiċi morfoloġiċi u bijokimiċi. Meta tinvestiga gruppi patoġeniċi ta 'mikro-organiżmi, huwa importanti li tkun taf kemm hija effettiva l-azzjoni ta' l-antibijotiċi.

Din kienet karatteristika ġenerali tal-metodu batterjoloġiku ta 'investigazzjoni.

Karatteristiċi ta 'l-analiżi

Ir-regola ewlenija għat-twettiq tar-riċerka batterjoloġika hija l-isterilità massima. Jekk ix-xogħol ikun għadu għaddej b'tubi tat-test, uċuħ u batterji għandhom jiġu replikati biss fuq l-ispirtu msaħħan.

L-istadji kollha tal-metodu batterjoloġiku ta 'l-investigazzjoni jeħtieġu l-użu ta' linja speċjali jew pipetta Pasteur. Iż-żewġ strumenti għandhom jiġu ttrattati mill-ġdid fil-fjamma tal-lampa ta 'l-ispirtu. Fir-rigward tal-pipetta Pasteur, imbagħad qabel l-isterilizzazzjoni termali huwa meħtieġ li tinqata 'l-ponta tal-pipetta bi pinzetta.

It-teknika tal-batterja taż-żrigħ għandha wkoll il-karatteristiċi tagħha stess. L-ewwelnett, meta żrigħ fuq medja solida, iwettaq linja tal-batterja fuq il-wiċċ ta 'l-agar. Il-linja, ovvjament, għandha diġà jkollha kampjun ta 'mikro-organiżmi fuq il-wiċċ. Huwa pprattikat ukoll li jinżergħa ġewwa l-mezz tal-kultura, f'liema każ il-linja jew il-pipetta għandhom jilħqu l-qiegħ tad-dixx Petri.

Meta taħdem b'medja likwida, jintużaw tubi. Huwa importanti li jiġi żgurat li l-likwidi ma jmissux it-truf tal-platti tal-laboratorju jew tas-sufra, u l-istrumenti (pipetta, loop) użati ma jmissux oġġetti u uċuħ barranin.

L-importanza tal-metodu bijoloġiku tar-riċerka

L-analiżi ta 'kampjun ta' batterji għandha l-applikazzjoni prattika tagħha. L-ewwelnett, il-metodu batterjoloġiku ta 'riċerka jista' jintuża fil-mediċina. Pereżempju, huwa meħtieġ li tiġi studjata l-mikroflora tal-pazjent sabiex tiġi stabbilita d-dijanjosi korretta, kif ukoll biex tinħadem it-trattament korrett. Hawnhekk l-antibijotekografu jgħin, li juri l-attività tad-drogi kontra l-aġent kawżattiv tal-mard.

L-analiżi tal-batterja tintuża fil-laboratorju biex tiddetermina mard perikoluż bħal tuberkulosi, tifojde rikurrenti jew gonorrea. Huwa wkoll użat biex jistudja l-kompożizzjoni batterika tat-tunsilli, il-kavitajiet tal-organi.

Il-metodu batterjoloġiku ta 'l-investigazzjoni jista' jintuża biex jiddetermina l-kontaminazzjoni ta 'l-ambjent. Skond il-komposizzjoni kwantitattiva u kwalitattiva tat-tnixxija mill-wiċċ ta 'l-oġġett, il-grad ta' popolazzjoni ta 'mezz partikolari huwa ddeterminat minn mikro-organiżmi.